14. Gomoriho impregnace. Příprava amoniakálního roztoku stříbra
14. Gomoriho impregnace.
Příprava amoniakálního roztoku stříbra
Gomoriho impregnace
– Gomoriho impregnace patří mezi impregnační metody, slouží k znázornění retikulárních vláken a používá se také v neurohistologii, k průkazu neuroglie a retikulárních vláken. Provádí se buď na parafinových řezech nebo na řezech krájených na zmrazovacím mikrotomu, k lepení parafinových řezů se používá 1 % želatina.
1) Deparafinace (X1, X2, A1, A2) – 5 minut, oplach v dest. vodě – 5 minut
2) Oxidace 0,5% manganistan draselný – 3 – 5 minut, dest. voda
3) Bělení 2% disiřičitan draselný – 2 minuty, praní ve vodě – 10 minut, oplach v dest. vodě
4) Moření 2% kamenec železitý – 1 minuta, praní ve vodě – 5 minut, vyměňovaná voda – 5 minut
5) Amoniakální roztok stříbra – 1 minuta, krátký oplach v dest. vodě
6) Redukce 10% neutrální formol – 5 minut (při zkalení roztok vyměníme), oplach v dest. vodě
7) Zlacení 0,1% chlorid zlatitý – 10 – 15 minut, oplach v dest. vodě
8) Fixace 1% thiosíran sodný – 1 minuta, praní ve vodě – 5 minut, oplach v dest. vodě
9) Jádrová červeň – 5 – 10 minut, oplach v dest. vodě
10) Odvodnění (A1, A2, KX); projasnění (X1, X2); montování
VÝSLEDEK BARVENÍ
Retikulární vlákna – černě
Kolagenní vazivo – šedohnědě
Jádra – červeně
Příprava amoniakálního roztoku stříbra
10% dusičnan stříbrný + 10% hydroxid sodný
vznikne sraženina, přidáváme po kapkách amoniak, za stálého třepání do rozpuštění sraženiny, potom přidáme po kapkách 10% dusičnan stříbrný, po každé kapce tekutinu protřepáme, přidáváme tak dlouho dokud se rozpouští a roztok zůstane opalescenční; roztok se doplní dest. vodou do 100ml