21. Znázornění mitochondrií. Přehled a použití cytologických metod

21. Znázornění mitochondrií. Přehled a použití cytologických metod

Znázornění mitochondrií

Mitochondrie se dají znázornit základní cytologickou metodou – Heidenhainovou metodou

1) Deparafinace (X1, X2, A1, A2) – 5 minut, oplach ve dest. vodě – 5 minut
2) Moření v 2,5% kamenci železitém (síran železito amonný) – 24 hodin (20 minut ve škole), oplach dest. vodě
3) Alkoholický roztok hematoxylinu – 24 hodin (20 minut ve škole), oplach v dest. vodě
4) Diferenciace ve 2,5% kamenci železitém (zčernání jader a plazma šedá)
5) Praní v pramenité vodě – 15 minut
6) Odvodnění (A1, A2, KX); projasnění (X1, X2); montování

VÝSLEDEK BARVENÍ
Jaderný chromatin, mitochondrie, sekreční granula – modročerně až hnědočerně

Přehled a použití cytologických metod
Cytologické metody slouží k průkazu:
1. Základních cytologických struktur
– mitochondrie, centrioly, jadérka, jaderný chromatin
– dají se prokázat Hiedenhainovým barvením

2. Produktů metabolismu
– např. PAS-reakce
1) Deparafinace (X1, X2, A1, A2) – 5 minut, oplach ve vodě – 5 minut
2) 1% kyselina jodistá 5 minut, praní ve vodě 10 minut
3) Schiffovo reagens 5 – 20 minut v temnu, praní ve vodě 10 minut
4) Harrisův hematoxylin 3 – 5 minut, oplach vodou 5 minut
5) Odvodnění (A1, A2, KX); projasnění (X1, X2); montování

VÝSLEDEK BARVENÍ
PAS+ substance (glykogen, neutrální mukopolysacharidy, mukoproteiny) – purpurově červeně
Jádra – modře